Gensyntheseservice - Genosphere Biotechnologies
Synthese von komplexen Genen ...
Genosphere Biotechnologies synthetisiert für Sie dsDNA / endotoxinfreie Plasmid DNA .
Wir synthetisieren auch schwierige GC reiche DNA und DNA mit Hairpin-Strukuren ..
Alle Gene werden durch dsDNA-Sequenzierung verifiziert. Sie erhalten die zu „100 % richtige Sequenz“ - Garantiert !
Unser Gensynthese Service beinhaltet:
Codon-Optimierung ihrer DNA-Sequenz, falls dies gewünscht wird.
Synthese der notwendigen DNA Abschnitte.
Klonierung der dsDNA in ein multicopy Plasmid (pUC57, pBluescript *).
Transformation von E. Coli.
Isolation der Plasmid-DNA.
Doppelsträngige Sequenzierung der Insert-DNA.
Subklonierung und Proteinexpression sind optionale Services. Gerne erstellen wir Ihnen dazu ein unverbindliches Angebot.
Gene Synthesis - Turn Around Timetable.
| Gene Synthesis Service ; Turn Around Time | Service description (Standard) |
|---|---|
| Gene length: < 1kb ; 1 week | gene synthesis, cloning into pUC vector and ds sequencing. |
| Gene length: 1 to 2 kb ; Approx. 2 weeks | gene synthesis, cloning into pUC vector and ds sequencing. |
| Gene lenght: 2 to 3 kb ; Approx. 2 to 3 weeks | gene synthesis, cloning into pUC vector and ds sequencing. |
Sie erhalten 2 bis 5 µg der gereinigten Insert / Plasmid-DNA und die Sequenzierdaten. **)
Optional: Subklonierung in einen von Ihnen zur Verfügung gestellten (Expressions-) Vektor.
Optional: Protein-Expression u.a. in E. Coli und Hefe.
*) Wir subklonieren die Insert-DNA auch in ein von Ihnen zur Verfügung gestelltes Plasmid. Hierzu benötigen wir 5 µg Ihrer Plasmid-DNA und die dazugehörigen vollständigen Sequenz-Informationen.
**) Wir produzieren für Sie auch gerne größere Mengen an endotoxinfreier Plasmid DNA. Diese Serviceleistungen sind optional und werden jeweils einzeln berechnet.
Gensynthese
In unserem Gensynthese Labor synthetisieren, sequenzieren und (sub)klonieren wir auch GC-reiche Gen-Projekte.
Die Klonierung erfolgt z.B. in pUC57 Amp Plasmid oder pUC57 Kan Plasmid.
Durch eine optionale Expression in z.B. E.coli stellen wir für Sie das Protein bei Bedarf auch zunächst in kleinen Mengen (5 mg, 15 mg, Pilot) her.
Gerne machen wir Ihnen ein Angebot !
Bitte benutzen Sie für Ihre Anfrage unsere email-Adresse: gene@genosphere-biotech.com
Bitte machen Sie detaillierte Angaben zum Projekt und geben Sie bitte immer auch gleich die konkreten Gensequenzen an.
Gerne sind wir kurzfristig bereit, falls nötig, mit Ihnen über die Sequenzen eine Geheimhaltungsvereinbarung zu treffen!
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Gensynthese
Die Geschichte zur Herstellung von synthetischen Genen nahm ihren Anfang als Khorana et al. , 1972 sie zur Synthese eines tRNA-Gens
eingesetzt hatte. Nachfolgend wurden eine Reihe von Verfahren publiziert, die sich mit Genynthese im weitesten Sinne beschäftigen. Üblicherweise werden bei gängigen Syntheseverfahren die jeweiligen Gene oder Genabschnitte in kurze einzelsträngige, sich überlappende Oligonukleotide aufgeteilt, welche mittels automatischer Festphasensynthese hergestellt werden. Diese Oligonukleotide müssen anschließend gereinigt und zu den jeweiligen größeren Fragmenten mit Hilfe von DNA-Ligasen und DNA-Polymerasen
assembliert werden. Dabei entstehen zunächst Subfragmente, die ihrerseits über spezifische Überhänge in der richtigen Reihenfolge über Ligation miteinander verknüpft werden. Die Richtigkeit der Sequenz wird anschließend durch DNA-Sequenzierung überprüft.
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